TINCIÓN ACIDO-ALCOHOL RESISTENTE

LABORATORIO # 5

TINCIÓN ACIDO-ALCOHOL RESISTENTEObjetivos

Aplicar  las técnicas  de coloración de microorganismos ácido-resistentes para diferenciarlos e identificarlos, en base a sus propiedades morfológicas.

Materiales

·         Un cultivo de 72 horas de mycobacterium.

·         Un cultivo de 24 horas de streptococcus.

Reactivos

·         Azul de metileno

·         Alcohol acidulado

Procedimientos

1.                  Prepara un frotis bacteriano. Haciendo un delgado extendido del material para su estudio y permitir que se seque al aire.

2.                  Fijar el frotis con calor, evitar que hierva

3.                  Cubrir la preparación con carbofucsina. o fuscina fenicada

4.                  Calentar la preparación en un mechero Bunsen durante 5 min. No debe hervir. Si se evapora, se añade más carbofucsina para que no se seque en ningún momento.

5.                  Lavar con agua el resto de colorante.

6.                  Decolorar con la mezcla ácido-alcohol.  Hasta que solo permanezca un  tenue color  rosa.

7.                  Lavar con agua para que no prosiga la decoloración.

8.                  Teñir con azul de metileno 1 min.

9.                  Lavar con agua el resto de colorante.

10.              Secar la preparación.

11.              Examinar al microscopio. Con objetivo de inmersión por 100 X ( aceite)

*La tinción es positiva para bacilos rojos contra un fondo azul claro

Cuestionario

1.      ¿Qué  Clasificación  de bacterias pueden ser encontradas en este tipo de tinción?

En esta tinción es muy limitado el número de géneros de bacterias de ácido-alcohol resistente:

·         Mycobacterium

·         Nocardia

2.      ¿Qué otro nombre recibe la  tinción ácido- alcohol- resistente?

      La tinción de ácido-alcohol resistente también recibe el nombre de tinción de Ziehl-Neelsen.

3.      ¿Qué coloración se tiñen las bacterias bacilares en la tinción ácido- alcohol- resistente que da como resultado la reacción positiva?

Si la tinción es positiva las bacterias bacilares se tiñen de rojo contra un fondo azul claro.

4.      ¿Qué función tiene el alcohol en la técnica de tinción?

El alcohol tiene como función la decoloración de la pared de las células para que puedan ser clasificadas y conservarlas por más tiempo.

5.      ¿Qué especies de Mycobacterium son los causantes de la tuberculosis?

·         Mycobacterium tuberculosis

6.      ¿Qué especie de Mycobacterium es el responsable de la lepra?

·         Mycobacterium leprae

Conclusión

La tinción Ácido-alcohol resistente es la propiedad física de algunas bacterias a la resistencia a la decoloración de la fucsina básica (rojo) la cual penetra en la célula por acción del fenol y el calor.

Las bacterias ácido-alcohol resistentes no pueden ser clasificados según la tinción de Gram.

               La tinción acido-alcohol resistente solo tiñe bacterias:Mycobacterium, Nocardia